Научный журнал
Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований

ISSN 1996-3955
ИФ РИНЦ = 0,618

СТАНДАРТИЗАЦИЯ САПОНИНСОДЕРЖАЩИХ ПРЕПАРАТОВ, ОБЛАДАЮЩИХ ПРОТИВОВИРУСНОЙ АКТИВНОСТЬЮ

Алексюк П.Г. 1 Молдаханов Е.С. 1 Аканова К.С. 1 Анаркулова Э.И. 1 Богоявленский А.П. 1 Березин В.Э. 1
1 Институт микробиологии и вирусологии КН МОН РК
1. Турмагамбетова А.С., Зайцева И.А., Соколова Н.С., Абитаева М.С., Богоявленский А.П., Березин В.Э. Вирусингибирующие свойства сапонинсодержащих растительных экстрактов // Материалы международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы вирусологии, микробиологии, гигиены, эпидемиологии и иммунобиологии», Алматы, 2012. – С. 77
2. Oleszek W., Bialy Z. Chromatographic determination of plant saponins--an update (2002-2005) // J Chromatogr A. – 2006. – Vol. 1112, N 1-2. – P. 78-91
3. Gray M.J., Chang D., Zhang Y., Liu J., Bensoussan A. Development of liquid chromatography/mass spectrometry methods for the quantitative analysis of herbal medicine in biological fluids: a review // Biomed Chromatogr. – 2010. – Vol. 24, N 1. – P. 91-103.
4. Tao W., Duan J., Zhao R., Li X., Yan H., Li J., Guo S., Yang N., Tang Y. Comparison of three officinal Chinese pharmacopoeia species of Glycyrrhiza based on separation and quantification of triterpene saponins and chemometrics analysis// Food Chem. – 2013. – Vol. 141, №3. – P. 1681-1689.

Проблема поиска новых биологически активных веществ и создание на их основе эффективных лекарственных средств для лечения и профилактики вирусных инфекций, является одной из важнейших задач не только вирусологии, но и органической, биоорганической и медицинской химии. Это обусловлено рядом причин, основной из которых является появление новых вариантов возбудителей вирусных респираторных инфекций, устойчивых к применяемым препаратам. Одним из перспективных путей при разработке новых лекарственных средств является поиск биологически активных веществ среди доступных природных соединений и их производных. В наших исследованиях проводилось сравнительное изучение противовирусной активности препаратов, выделенных из 10 сапонинсодержащих растений, принадлежащих к различным семействам: Fabaceae, Sapindaceae, Caryophyllaceae, Betullaceae, Berberidaceae, Hippocastanaceae, Chenopodiaceae, Araliaceae [1]. Предварительные исследования показали, что препараты, полученные из растений Acacia concinna (Fabaceae), Sapindus mucorossi (Sapindaceae), Allochrusa gypsophiloides (Caryophyllaceae), Saponaria officinalis (Caryophyllaceae) обладают противовирусной активностью и являются перспективными для дальнейшей разработки.

Производство био- и фармпрепаратов на основе биологическиактивных соединений растительного происхождения требует решения двух вопросов: обеспечения достаточного объема сырьевой базы для производимого препарата и его стандартизации в тех случаях, когда точно не установлен химический состав многокомпонентного лекарственного средства. В отношении противовирусных препаратов, полученных из растений, отобранных по результатам настоящего исследования, первый вопрос решается достаточно просто – туркестанский мыльный корень (Allochrusa gypsophiloides) и красный мыльный корень (Saponaria officinalis) не только имеют достаточную сырьевую базу в странах Средней Азии, но и с успехом культивируются. Что касается индийских Acacia concinna и Sapindus mucorossi, то успешное их применение в области натуральных моющих средств привело к буму выращивания данных растений на территории стран произрастания. Стоимость 1 кг исходного сырья для данных растений не превышает 10 долларов.

Достаточно долгое время основными методами выявления и стандартизации тритерпеновых сапонинов в растительном сырье было определение 1) гемолитического индекса,
2) пенного числа, 3) токсичности для холоднокровных животных, 4) проведение гравиметрического анализа на основе разной степени растворимости сапонинов и 5) химический анализ (реакция Лафона, нитрат натрия, раствор холестерина). Эти методы в силу ряда объективных причин показывают несколько завышенные результаты, поэтому в настоящее время для стандартизации сапонинсодержащих препаратов широко используются хроматографические и спектрометрические методы анализа [2-4].

В представленных исследованиях для стандартизации препаратов, выделенных из растений Acacia concinna, Sapindus mucorossi, Allochrusa gypsophiloides, Saponaria officinalis, использовался метод ВЭЖХ на колонках C18, позволяющий с достаточной степенью достоверности определять не только качественный, но и количественный состав полученных препаратов. В качестве подвижной фазы была использована система растворителей: вода – ацетонитрил в условиях градиентного элюирования в присутствии трифторуксусной кислоты (рН 2,5). Наилучшее разделение сапонинсодержащих препаратов наблюдалось при скорости потока подвижной фазы 1 мл/мин и объеме вводимой пробы – 10 мкл.

Для проверки пригодности хроматографической системы использовали коммерческие сапонинсодержащие растворы. Расчет параметров хроматографической системы проводился для пиков сапонинов на 5 хроматограммах, полученных при фракционировании растительных экстрактов.

Воспроизводимость методики характеризовалась величиной стандартного отклонения S (0,1876) или относительным стандартным отклонением RS (3,69 %) для серии измерений на примере одного образца сырья в 10 независимых повторностях.

На основании полученных результатов установлено, что между величинами площадей хроматографических пиков и содержанием сапонинов соблюдалась линейная зависимость, подтверждающая валидацию данной методики стандартизации сапонинсодержащего растительного сырья.

По результатам валидации установлено, что приведенная методика является специфичной для определения содержания сапонинов в растительном сырье, характеризуется корректной точностью и воспроизводимостью, линейной зависимостью, что позволяет использовать ее для достоверной оценки качества растительных препаратов, содержащих сапонины.

Таким образом, для стандартизации растительных препаратов, содержащих сапонины, разработана методика количественного определения тритерпеновых гликозидов с использованием метода ВЭЖХ в препаратах из Acacia concinna, Sapindus mucorossi, Allochrusa gypsophiloides, Saponaria officinalis. Показано, что данная методика не зависит от типа используемого растительного препарата и может использоваться для стандартизации сапонинсодержащих растительных препаратов.


Библиографическая ссылка

Алексюк П.Г., Молдаханов Е.С., Аканова К.С., Анаркулова Э.И., Богоявленский А.П., Березин В.Э. СТАНДАРТИЗАЦИЯ САПОНИНСОДЕРЖАЩИХ ПРЕПАРАТОВ, ОБЛАДАЮЩИХ ПРОТИВОВИРУСНОЙ АКТИВНОСТЬЮ // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. – 2014. – № 6. – С. 80-81;
URL: http://www.applied-research.ru/ru/article/view?id=5192 (дата обращения: 21.09.2018).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.252