Научный журнал
Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований

ISSN 1996-3955
ИФ РИНЦ = 0,580

ОЦЕНКА КАЧЕСТВЕННЫХ И КОЛИЧЕСТВЕННЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ МИКРОФЛОРЫ КИШЕЧНИКА В КАЧЕСТВЕ КРИТЕРИЕВ ОЦЕНКИ ЭФФЕКТИВНОСТИ ЛЕЧЕНИЯ ЛЯМБЛИОЗА

Насакаева Г.Е. 1 Бексеитова А.Ж. 1 Оспанова А.С. 1 Сексенова А.Н. 1 Джаппарова М.Б. 1 Ташенов С.Т. 1 Кошанова А.С. 1
1 Карагандинский государственный медицинский университет
Бактериологическое исследование кала является показателем состояния кишечного микробиоценоза. Всего обследовано 80 пациентов, из них 43 мужчины и 37 женщин в возрасте от 18 до 45 лет. У всех пациентов проведено комплексное клинико-бактериологическое обследование и отдельно проведено обследование на лямблиоз. Лямблиозная инвазия изменяет качественные и количественные характеристики микробиоценоза кишечника. При этом угнетается анаэробный спектр кишечного биоценоза, увеличивается количество условно-патогенной микрофлоры и снижается местная резистентность толстого кишечника. После традиционного противогельминтного лечения наблюдается незначительная коррекция кишечного микробиоценоза, что выражается в увеличении количества облигатных анаэробов и уменьшении степени дисбиоза кишечника. Локальная резистентность кишечника после лечения осталась на низком уровне. Поэтому для восстановления кишечной микрофлоры после лечения препаратом «Мебендазол» целесообразно использовать пробиотики (лактобактерин, бификол, линекс).
лямблиоз
бактериологическое исследование
микрофлора кишечника
1. Авдюхина Т.И., Константинова Т.Н., Прокошева М.Н. Современный взгляд на проблему гельминтозов у детей и эффективные пути ее решения // Лечащий врач. – 2004. – № 1. – С. 24-29.
2. Азизов И.С. Основы клинической микробиологии. – Караганда, 2006. – С. 279.
3. Апенченко Ю.С. Лямблиоз удетей. – Тверь, 2007. – 157 с.
4. Захарова Е.А., Азизов И.С. Сравнительная оценка чувствительности к противогрибковым препаратам грибов рода кандида, выделенных от детей и взрослых с дисбактериозом кишечника // Успехи медицинской микологии. – М.: Национальная академия микологии. – 2007. – Т. 10. – С. 168-169.
5. Котова А.Л., Рамазанова Б.А., Мустафина К.К. и др. Нормофлора и дисбактериозы человека. – Алматы: ТОО «Люкс Биндер Сервис». – 2008. – С. 512.
6. Lymbery A.J. Parasitesandecosystemhealth // International Journal for Parasitology. – 2005. – Vol.35, № 7. – Р.705-716.
7. Mohammed Mahdy A.K., Surin J., Wan KL еt аl. Giardia intestinalis genotypes: Risk factors and correlation with clinical symptoms // Acta Trop. – 2009. – Vol. 112 (1). – Р. 67–70.
8. Шайзадина Ф.М., Брицкая П.М., Култанов Б.Ж. Эпидемиологическая ситуация по гельминтозным инвазиям среди населения в центральном Казахстане // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. – 2013. – №5. – С.14.

Взаимоотношения организм человека и окружающая среда представляют собой единую экологическую систему, находящуюся в состоянии биологического равновесия. С современных позиций нормальную микрофлору рассматривают как совокупность микробиоценозов различных биотопов, центральным и наиболее густо заселенным из которых является микробиоценоз кишечника [6,7].

Паразитарные инвазии, в том числе лямблиоз, представляют собой биосоциальное многоуровневое явление, для их диагностики необходимы комплексные исследования – клинические, микробиологические, паразитологические, экологические, эпидемиологические.

При этом именно комплекс лабораторных исследований позволяет клиницисту и эпидемиологу не только уточнить этиологию инфекционного процесса, но и разработать на этой основе действенную систему профилактических мероприятий для оздоровления населения. В работах российских ученых Одинцевой В.Е. с соавторами описан метод лечения лямблиоза высокоэффективным препаратом как мебендазол. Значительные нарушения микроэкологического равновесия вызывают использование сильнодействующих противолямблиозных препаратов, что в свою очередь вызывает элиминацию не только возбудителя инфекционного процесса, но и полезные микроорганизмы. Рациональным является одновременное назначение лекарственных средств, способствующих восстановлению нормальной микрофлоры.

Изменения в количественном составе микрофлоры кишечника обычно сопровождаются увеличением условно-патогенных микроорганизмов на фоне снижения бифидо- и лактобактерий, вследствие чего нарушается трофика, обезвреживание токсических продуктов в печени, снижается иммунологическая (в том числе колонизационная) резистентность. Настораживают данные, что канцерогенез ускоряется на фоне дисбактериоза, проблема формирования дисбактериоза, вредных последствий его для здоровья пациентов разного возраста, становиться проблемой для современной медицины. В научных работах Котовой А.Л. с соавторами в связи с этим была изучена распространенность паразитарных инвазий у подростков г. Алматы. При изучении распространенности простейших в кишечнике человека были обнаружены с одинаковой частотой – Lamblia intestinalis и Trichomonas hominis. Наличие микст-инфекции, вызванных простейшими, выявлено у 1,4+-0,5 %. Были обнаружены простейшие, которые не являются патогенными для человека (у 0,6+-0,3 % подростков были обнаружены Entamoeba coli и Chilomastix mesnili). При изучении распространения гельминтов кишечника среди практически здоровых подростков г. Алматы, были выявлены круглые черви (класса нематоды) Enterobius vermicularis (2.6 %), Ascaris lumbricoides (3.0 %). В этих работах при обследовании инвазированных подростков, использовали анкеты, направленные на выявление анамнестических данных и жалоб, характерных для нарушений системы пищеварения. В работах Рамазановой Б.А с соавторами, проведен подробный анализ паразитологических и микробиологических исследований фекалий условно здоровых подростков, это исследование позволило выявить паразитарные инвазии у 31,4 % обследованных. Удельный вес подростков с паразитарными инвазиям и в 3-х группах обследованных колебался от 30,6 до 32,0 %. Все это сопровождается гиповитаминозом, снижением реактивности организма, его сопротивляемости к инфекционным заболеваниям, особенно кишечным инфекциям [5,2,6].

Цель исследования: определить состав и оценить состояние микробиоценоза кишечника у больных с лямблиозом, до и после противолямблиозного лечения.

Материалы и методы исследования

Бактериологическое исследование кала является показателем состояния кишечного микробиоценоза [6]. Исследование проводилось в соответствии с приказом Министерство Здравоохранении Республики Казахстан №60 от 12.09.2003 г. «Об утверждении методических рекомендаций и указаний».

Забор фекалий производился в объеме 1-3 г, в специализированные транспортные стерильные флаконы и доставка в лабораторию осуществлялась в течение 2-х часов от момента сбора. При доставке кала в лабораторию посев производится немедленно.

Всего обследовано 80 пациентов, у которых выделено 284 микроорганизма, проведено 333 обследований. Из них обследовано 43 мужчины и 37 женщин в возрасте от 18 до 45 лет. У всех пациентов проведено комплексное клинико-бактериологическое обследование и отдельно проведено обследование на лямблиоз.

Из 60 пациентов с дисфункцией желудочно-кишечного тракта у 56 (93 %) -спастическая дискенезия толстой кишки с наличием запоров, длительных запоров, у 43 (72 %) – неустойчивый стул; у 16 (27 %)- метеоризм, у 17 (28 %) – тошнота, у 5 (8 %) – понос. Атопический дерматит и аллергические сыпи – у 40 (67 %). Боли в животе без конкретной локализации, независимо от приема пищи, проходящие сами по себе («летучие» боли) отмечались у 42 пациентов (70 % от общего числа), еще у 7 пациентов (12 %) были жалобы на периодически возникающие интенсивные боли – типа колик, неприятная тяжесть и боли в эпигастрии. Нарушение аппетита у 41 (68 %) пациента выражалось в снижении аппетита, у 17 (28 %) пациентов – в необоснованном его повышении. Приобретенная непереносимость жареной, жирной, острой пищи; молочных продуктов, хлебных, крупяных изделий которую пациенты связывают с лямблиозом, потеря массы тела на 2-5 кг за 3-6 месяцев, дискинезия желчных путей, хронический гастрит, склонность к частым простудным заболеваниям, слабость, утомляемость, беспокойный сон и повышенная возбудимость у пациентов, повышенная потливость, зуд.

Среди всех проанкетированных пациентов, проживающих в Караганде и Карагандинской области, у 39,2 % наблюдались – хроническое течение лямблиоза. При анализе анкетных данных было отмечено, что 18,6 % пациентов женщин из основной группы находились на диспансерном учете у следующих специалистов: гастроэнтеролог, инфекционист, аллерголог [8].

Результаты исследования и их обсуждение

При исследовании кишечного микробиоценоза из группы здоровых лиц, включенных в контрольную группу, в 6,6 % случаев отсутствуют какие-либо сдвиги в качественном и количественном составе экологически значимых групп микроорганизмов – эубиоз. В остальных случаях (93,3 %) были отмечены качественные или количественные изменения в составе микробиоценоза. Отклонения, соответствующие дисбактериозу I степени были выявлены у 60,2 % обследованных, в 33,2 % случаев отклонения соответствовали дисбактериозу II степени. Дисбактериоз III степени был выявлен у 6,6 % обследованных пациентов.

Анализ по отдельным группам выявил ряд специфических особенностей, описанных ниже. Резидентные представители кишечной микрофлоры – кишечные палочки были выявлены в составе кишечной микрофлоры у всех обследованных условно-здоровых лиц. При этом E.coli в минимальном диагностически значимом титре (6 Lg КОЕ/г) были выявлены у 20 % пациентов. В большей части случаев кишечные палочки были обнаружены в титрах 7 и 8 Lg КОЕ/г (31,1 % и 46,7 % соответственно).

Условно-патогенная микрофлора, выделенная в группе здоровых лиц, характеризовалась разнообразным качественным составом. Помимо энтеробактерий, условно-патогенная флора была представлена представителями рода Enterococcus (E.faecalis) с β-гемолитической активностью (9,1 %).

Одним из значимых аспектов в оценке микробиоценоза кишечника является оценка количественного и качественного состава лакто- и бифидобактерий, как одних из основных эндогенных регуляторов, обеспечивающих консервативный характер его видового состава. В 6,7 % наблюдений титр лактобактерий составил 4 Lg, в 20 % – 5 Lg, в 17,8 % – 6 Lg, в 11,1 % – 7 Lg и в 4,4 % – 8 Lg. Значительное снижение титра бифидобактерий (ниже 7 Lg КОЕ/г) было отмечено в четверти наблюдений (24,4 %). Бифидобактерии в титре 7 Lg КОЕ/г были обнаружены у 15,6 % обследуемых. В большей части случаев (51,1 %) титр бифидобактерий составил 9 Lg КОЕ/г и только у 8,9 % – 11 Lg КОЕ/г.

Анализ по группам микроорганизмов выявил следующие специфические особенности, в частности, резидентные представители микрофлоры кишечника – E.coli – кишечные палочки высевались в составе кишечной микрофлоры у всех обследованных, при этом E.coli в минимальном диагностические значимом титре (6 Lg КОЕ/г) были выявлены у 20 % пациентов преимущественно у женщин. В большей части случаев (68 %) кишечные палочки были обнаружены в титрах 7 и 8 Lg КОЕ/г (32 % и 36 % соответственно). В 5 % наблюдений титр E.coli составил 9 Lg КОЕ/г. Слабо ферментирующие E.coli выявлялись у 20 % обследованных в группе с лямблиозом, у этих же пациентов 7 % наблюдений были выявленные кишечные палочки с гемолитической активностью.

Важной частью кишечного биотопа являются энтерококки, которые идентифицированные в 46 % случаев. Это 62 % культуры Enterococcusfaecalis и 37 % культуры Enterococcusfaecium.

У больных с диагнозом «Лямблиоз» по сравнению с контрольной группой выявлено угнетение анаэробного спектра кишечного микробиоценоза, что выражалось в уменьшении количества бифидобактерий до титра 7-6 lg КОЕ/г. и в уменьшении количества лактобактерии до титра 6-5 lg КОЕ/г., со сниженным уровнем кишечной палочки в микробном пейзаже кишечника (рис. 1,2).

nasak1.tiff

Рис. 1. Количество дисбиозов толстого кишечника больных лямблиозом, содержащих в своем составе условно-патогенную микрофлору

nasak2.tif

Рис. 2. Состав условно-патогенной флоры у больных с лямблиозом

Кишечные палочки с нормальной ферментативной активностью были выявлены в составе кишечной микрофлоры у всех обследованных больных лиц. При этом E.coli в минимальном диагностически значимом титре (6 lg КОЕ/г) были выявлены у 27 % пациентов. В 68 % случаев кишечные палочки были обнаружены в титрах 7 и 8 lg КОЕ/г. В 5 % наблюдений титр E.coli составил 9 lg КОЕ/г. Наблюдалось в 12 % процентах случаев появление гемолизирующих эритроциты человека и потерявших фермент разлагающий сахар лактозу E. coli. Гемолитически активные кишечные палочки составили 5 % обследованных, лактозонегативные кишечные палочки соответственно – 7 %. Снижение местной иммунологической резистентности кишечника наблюдали, у 98 % обследованных. В основном это выражалось в наличии низких уровней лизоцима (отсутствие лизоцима в разведении 10-1).

Важной частью кишечного биотопа являются энтерококки, которые идентифицированные в 46 % случаев. Это 62 % культуры Enterococcusfaecalis и 37 % культуры Enterococcusfaecium.

Выявлена колонизация слизистой условно-патогенными бактериями в количествах превышающих значения нормального микробиоценоза толстого кишечника. Идентифицированы представители рода Staphylococcus в 19 % случаев (36 % культуры St.aureus, 64 % культуры St. saprophyticus). Выделены представители семейства Enterobacteriacea в 7 % случаях, из них 60 % культуры Enterobactercloacea, 20 % Enterobacteraerogenes, 20 % Klebsiellapneumonia. Выделены грибы рода Candida в 8 % случаев.

У пролеченных больных отклонения от нормальных значений в биотопе толстого кишечника, выявленные до лечения, регистрируются в меньшей степени. Уменьшилась частота выявления условно-патогенных микроорганизмов, лактозонегативных и гемолитических кишечных палочек. Кишечные палочки с нормальной ферментативной активностью выявлялись в большей части случаев в титре 7-8 lg КОЕ/г. Снижение локальной резистентности кишечника (отсутствие лизоцима в разведении 10-1 материала) осталось на прежнем уровне – выявлялось в 97 % случаев. При этом наблюдается увеличение количества бифидобактерий до титра 8-9 lg КОЕ/г. и лакто бактерий до титра 7-8 lg КОЕ/г .

При выявленном лямблиозе назначался препарат «Мебендазол», проводили изучение показателей у лиц опытной группы спустя 1,5 месяца после стандартного противогельминтного лечения препаратом.

Изучение микробиоценоза кишечника пациентов с лямблиозной инвазией показало, что состав кишечного микробиоценоза пациентов с диагнозом «Лямблиоз» по сравнению с контрольной группой в 100 % случаев характеризовался наличием качественных или количественных изменений в составе нормофлоры и диагностически значимых групп микроорганизмов, характеризующих микробный пейзаж толстого кишечника. При этом в 5,9 % случаев была выявлена ассоциация условно-патогенных бактерий и 3,9 % ассоциация грибов рода Candida.

Лактобактерии и бифидобактерии в диагностически значимых титрах присутствовали в 56,2 % и в 71,1 % случаев соответственно.

В преобладающем большинстве случаев отклонения в группе обследованных пациентов с диагнозом лямблиозная инвазия, соответствовали дисбактериозу II – III степени.

Определив состав микробиоценоза кишечника у лиц с гельминтозной инвазией в процессе выполнения данного исследования оценивали состояние микробиоценоза кишечника после противогельминтного лечения, у пролеченных больных с лямблиозом отклонения от нормальных значений в биотопе толстого кишечника, выявленные до лечения, регистрируются в меньшей степени. Уменьшилась частота выявления условно-патогенных микроорганизмов, лактозо-негативных и гемолитических кишечных палочек. Кишечные палочки с нормальной ферментативной активностью выявлялись в большей части случаев в титре 7 lg КОЕ/г – 8 lg КОЕ/г. Снижение локальной резистентности кишечника (отсутствие лизоцима в разведении 10-1 материала) осталось на прежнем уровне – выявлялось в 97 % случаев, для восстановления данного показателя необходим более длительный период восстановления. При этом наблюдается увеличение количества бифидобактерий до титра 8-9 lg КОЕ/г. и лактобактерий до титра 7-8 lg КОЕ/г.

Заключение

Таким образом, лямблиозная инвазия изменяет качественные и количественные характеристики микробиоценоза кишечника. При этом угнетается анаэробный спектр кишечного биоценоза, увеличивается количество условно-патогенной микрофлоры и снижается местная резистентность толстого кишечника.

После традиционного противогельминтного лечения наблюдается незначительная коррекция кишечного микробиоценоза, что выражается в увеличении количества облигатных анаэробов и уменьшении степени дисбиоза кишечника. Локальная резистентность кишечника после лечения осталась на низком уровне. Поэтому для восстановления кишечной микрофлоры после лечения препаратом «Мебендазол» целесообразно использовать пробиотики (лактобактерин, бифиформ, линекс).


Библиографическая ссылка

Насакаева Г.Е., Бексеитова А.Ж., Оспанова А.С., Сексенова А.Н., Джаппарова М.Б., Ташенов С.Т., Кошанова А.С. ОЦЕНКА КАЧЕСТВЕННЫХ И КОЛИЧЕСТВЕННЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ МИКРОФЛОРЫ КИШЕЧНИКА В КАЧЕСТВЕ КРИТЕРИЕВ ОЦЕНКИ ЭФФЕКТИВНОСТИ ЛЕЧЕНИЯ ЛЯМБЛИОЗА // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. – 2016. – № 1-3. – С. 355-359;
URL: http://www.applied-research.ru/ru/article/view?id=8510 (дата обращения: 04.03.2021).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074