Научный журнал
Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований

ISSN 1996-3955
ИФ РИНЦ = 0,580

АССОЦИАЦИИ ВАРИАБЕЛЬНЫХ САЙТОВ (RS4343 И RS4291) ГЕНА АНГИОТЕНЗИНПРЕВРАЩАЮЩЕГО ФЕРМЕНТА С НЕБЛАГОПРИЯТНЫМ ГОСПИТАЛЬНЫМ ИСХОДОМ У БОЛЬНЫХ ОСТРЫМ КОРОНАРНЫМ СИНДРОМОМ БЕЗ ПОДЪЕМА СЕГМЕНТА ST

Бернс С.А. 1, 2 Шмидт Е.А. 1 Макеева О.А. 1 Нагирняк О.А. 1 Клименкова А.В. 3 Жидкова И.И. 1 Барбараш О.Л. 1
1 ФГБНУ «Научно-исследовательский институт комплексных проблем сердечно-сосудистых заболеваний»
2 ГБОУ ВПО «Московский государственный медико-стоматологический университет им. А.И. Евдокимова»
3 ГБУЗ «Кемеровский областной клинический кардиологический диспансер им. акад. Л.С. Барбараша»
В работе изучена ассоциация вариабельных сайтов генов эндотелиальной дисфункции: ангиотензинпревращающего фермента (АСЕ) [rs4291 и rs4343] с неблагоприятным госпитальным исходом у больных с острым коронарным синдромом без подъема сегмента ST (ОКСбпST). В исследование было включено 188 пациентов с ОКСбпST. Проведено генотипирование вариабельных сайтов генов: АСЕ (rs4291 и rs4343) методом TaqMan. Установлено, что у больных ОКСбпST неблагоприятный госпитальный исход ассоциирован с наличием гиперхолестеринемии, стенозирующего коронарного атеросклероза, а также носительством аллели G и генотипа G/G rs4343 и аллели T и генотипа T/T rs4291 гена АСЕ.
неблагоприятный госпитальный исход ОКСбпST
rs4291 и rs4343 гена АСЕ
1. Зыков М.В. Генетические маркеры прогрессирования атеросклероза экстракраниальных артерий у больных, перенесших острый коронарный сидром с подъемом сегмента ST / М.В. Зыков, И.С. Быкова, Р.Р. Салахов и др. // Инновационный конвент «Кузбасс: образование, наука, инновации». – 2012. – № 2 – C. 36.
2. Мартынович Т.В. Анализ полиморфизма генов ренин-ангиотензин-альдостероновой системы у пациентов с сердечно-сосудистыми заболеваниями / Т.В. Мартынович, Н.С. Акимова, Э.А. Федотов, и др. // Современные проблемы науки и образования. – 2015. – №3. – С.25.
3. Ратманова А. Рекомендации ACC/AHA/SCAI по чрезкожным коронарным вмешательствам: что нового? // Medicine Review (Клинические рекомендации). – 2008. – № 1. – С. 9–19.
4. Трубникова Е. В. Однонуклеотидный полиморфизм в геноме человека – важный объект молекулярно-генетических исследований в медицинской генетике [Электронный ресурс] / Е.В. Трубникова, Е.В. Кохтенко, Я.С. Куприянова. – URL: http://www.rusnauka.com/ 8_NIT_2008/Tethis/Biologia/27460.doc.htm (27.05.2013).
5. Baruah S. Insertion/Insertion Genotype of Angiotensin I-Converting-Enzyme Gene Predicts Risk of Myocardial Infarction in North East India / S. Baruah, M.S. Chaliha, P.K.Borah, R. Rajkakati, P.K. Borua, J. Mahanta // Biochem. Genet. 2016. Vol. 54(2). P. 134–46. (6)
6. Fatini С. Searching for a better assessment of the individual coronary risk profile: the role of angiotensin–converting enzyme, angiotensin II type 1 receptor and angiotensinogen gene polymorphisms / C. Fatini, R. Abbate, G. Pepe et al. // Eur. Heart J. 2000. Vol. 21. P. 633–638.
7. Jia E.Z. Renin–angiotensin–aldosterone system gene polymorphisms and coronary artery disease: detection of gene–gene and gene–environment interactions [Еlectronic resource] / E.Z. Jia, Z.X. Xu, C.Y. Guo. – URL : http://www.ncbi.nlm.nih.gov.
8. Makeeva O.A. The role of genetic factors in the prediction of myocardial infarction complications within one year follow up [Еlectronic resource] / O.A. Makeeva, M.V. Zykov, M.V. Golubenko. – URL : http://www.ncbi.nlm.nih.gov.
9. Niccoli G., Lanza G., Spaziani C. Plasma levels of thromboxane A2 on admission are associated with no–reflow after primary percutaneous coronary intervention // Eur. Heart J. 2008. Vol. 29 (15). P. 1843–1850.
10. Vecoli C. Endothelial nitric oxide synthase gene polymorphisms in cardiovascular disease [Еlectronic resource] / C. Vecoli. – URL: http://www.ncbi.nlm.nih.gov.

По смертности острый коронарный синдром без подъема сегмента ST (ОКСбпST) занимает первое место в экономически развитых странах [3]. При изучении звеньев патогенеза острого коронарного синдрома (ОКС) особое внимание отводится дисфункции эндотелия (ДЭ), так как фаза повреждения сосудистой стенки является одной из первых. В настоящее время ДЭ рассматривается не только как составная часть патологического процесса, но и как первичный пусковой механизм развития ОКС. Прогрессирование атеросклероза напрямую или косвенно связано с функциями эндотелия, нарушение которых приводит к повышенной тромбогенности сосудистой стенки, воспалительным изменениям, вазореактивности и нестабильности атеросклеротической бляшки. Поэтому эндотелий рассматривается как мишень для лекарственного воздействия, профилактики и лечения ОКС [9].

В настоящее время стратегия исследования генетической составляющей многофакторных заболеваний включает в себя поиск вариабельных сайтов в важнейших генах-кандидатах и оценку их ассоциации с заболеванием или вариантами клинического течения. Важную роль в формировании ДЭ играют компоненты ренин-ангиотензиновой системы (РАС) и, в первую очередь, ген ангиотензинпревращающего фермента (АПФ). Уровень АПФ примерно на 50 % контролируется генетически [4]. Имеются данные литературы об ассоциации вариабельного сайта гена ангиотензинпревращающего фермента (ACE) со стабильными формами ишемической болезни сердца (ИБС) и инфарктом миокарда (ИМ) [6] и внезапной смертью [2]. Межиндивидуальные различия генотипов rs4291 и rs4343 гена АСЕ, кодирующих продукцию АПФ, могут определять выраженный характер ЭД и обуславливать неблагоприятное течение заболевания в госпитальном и отдаленном периоде у пациентов ОКСбпST.

Цель исследования: изучить ассоциацию вариабельных сайтов rs4291 и rs4343 гена АСЕ с неблагоприятным госпитальным исходом у больных ОКСбпST.

Материалы и методы исследования

C 2009 года в Научно-исследовательском институте «Комплексных проблем сердечно-сосудистых заболеваний» и на базе МБУЗ «Кемеровский кардиологический диспансер» создан регистр, в который включались пациенты с ОКСбпST. Протокол данного исследования одобрен этическим комитетом Кемеровского кардиологического диспансера. Критериями включения участников исследования являлись: 1) подписанная пациентом форма информированного согласия на участие в исследовании; 2) возраст старше 18 лет; 3) возникшие в течение 48 часов до госпитализации Q-необразующий ИМ или нестабильная стенокардия (НС). Критерием исключения явился ОКСбпST, осложнивший чрескожное коронарное вмешательство (ЧКВ) или коронарное шунтирование (КШ), а также наличие острых или обострение хронических воспалительных заболеваний, почечной и печеночной недостаточности, заболеваний легких и онкологической патологии. За период с 15.01.2009 по 28.12.2009 в регистр включено 415 последовательно госпитализированных пациентов с ОКСбпST. Схема обследования пациентов включала стандартный перечень лабораторно-инструментальных методов для стационара кардиологического профиля. Среди пациентов 248 (59,8 %) были мужчинами, со средним возрастом 62 (53;71) года, 170 пациентов (40,9 %) являлись курильщиками, 325 пациента (78,3 %) имели в анамнезе стенокардию, 373 (89,8 %) больных – АГ, 153 (36,8 %) пациентов – перенесенный ИМ. Сахарный диабет 2 типа был выявлен в 80 (19,2 %) случаев, а ишемический инсульт в анамнезе – в 12,0 % (n=50) случаях. В условиях стационара все пациенты при отсутствии противопоказаний получали антикоагулянтную, антиагрегантную терапию, бета-блокаторы, ингибиторы ангиотензинпревращающего фермента, статины. Коронароангиографию (КАГ) проводили в случае письменного согласия на выполнение КАГ и чрескожного коронарного вмешательства (ЧКВ) со стентированием. В госпитальном периоде экстренное ЧКВ проводилось 185 (44,6 %) пациентам. В плановом порядке проведение КШ рекомендовано 88 (21,2 %), а ЧКВ – 51 (12,3 %) пациентам. Для проведения генотипирования была сформирована выборка пациентов (n=188), значимо не отличавшаяся по клиническим характеристикам от больных регистра.

Забор крови для генотипирования по вариабельным сайтам гена АСЕ (rs4291 и rs4343) производился в течение госпитального периода. Дезоксирибонуклеиновая кислота выделялась из лейкоцитов крови модифицированным методом фенол/хлороформной экстракции по методу Т. Маниатис. Генотипирование проводили методом TaqMan-проб на приборе «iCycler iQ» (BIO-RAD, США) посредством полимеразной цепной реакции для TaqMan-генотипирования выполнялась согласно инструкции Applied Biosystems, США. Распределения генотипов по исследованным полиморфным локусам проверяли на соответствие ожидаемым при равновесии Харди-Вайнберга с помощью критерия χ2. Для изучения популяционной распространенности указанных генетических вариантов была изучена группа контроля относительно здоровых индивидуумов, состоящая из 187 человек.

Статистический анализ результатов исследования проводился с помощью программ: STATISTICA версии 8.0 компании StatSoft, Inc (США) и калькулятора Генэксперт. Две независимые группы по количественному признаку сравнивались при помощи U-критерия Манна-Уитни. Анализ различия относительных показателей осуществлялся при помощи критерия χ² Пирсона или критерия Фишера с двусторонней доверительной вероятностью в том случае, если в какой-либо из подгрупп количество наблюдений было менее 5. Расчитывался относительный риск (OR) c 95 % доверительным интервалом (CI). Различия в сравниваемых группах считались достоверными при уровне двусторонней статистической значимости (р) менее 0,05.

Результаты исследования и их обсуждение

В изучаемой выборке (n=188) были проанализированы следующие «конечные точки» (КТ): показатели общей смертности, наличие повторных НС, ИМ, ОНМК – эти события расценивались как неблагоприятный исход. На госпитальном этапе выявлено 24 (15,9 %) пациентов с неблагоприятным исходом и 164 (87,20 %) – с благоприятным. Структура КТ представлена в табл. 1.

Таблица 1

Структура неблагоприятных исходов на госпитальном и годовом этапе наблюдения у больных ОКСбпST

Конечные точки на госпитальном этапе

Пациенты, n=188

Нефатальный инфаркт миокарда, n ( %)

6 (3,19)

Летальность, n ( %)

5 (2,65)

Ишемический инсульт, n ( %)

1 (0,53)

Рецидивирующая ишемия миокарда (нестабильная стенокардия), n ( %)

12 (6,38)

При оценке клинических факторов и морфологических особенностей коронарного русла в группах пациентов с различным госпитальным исходом, установлено, что пациенты с ОКСбпST с неблагоприятным исходом, несмотря на более молодой возраст, чаще имели реваскуляризирующие процедуры в анамнезе, гиперхолестеринемию, значимые стенозы коронарных артерий, в частности, совокупное поражение трех коронарных артерий со стенозами более 50 % (табл. 2).

Таблица 2

Клинические и инструментальные предикторы неблагоприятного госпитального течения заболевания у больных ОКСбпST

Факторы риска

Неблагоприятный

исход, n= 24

Благоприятный исход, n= 164

р

Клинико-анамнестические характеристики

Возраст, Med (25;75)

57 (53; 61)

61 (56; 67)

0,007

ИМТ, Med (25;75)

28,6 (23,7; 32,4)

29,8 (24,2; 33,8)

0,29

Курение, n ( %)

13 (54,16)

70 (42,68)

0,27

АГ, n ( %)

21 (87,5)

138 (84,1)

0,47

Мужчины, n ( %)

17 (70,8)

92 (56,0)

0,17

Гиперхолестеринемия, n ( %)

12 (50,0)

53 (32,3)

0,08

Наличие СД 2 типа, n ( %)

5 (20,8)

27 (16,4)

0,38

ФВ ЛЖ, Med (25;75)

57,2 (46,7; 63,1)

55,9 (49,3; 64,8)

0,31

Cтенокардия в анамнезе, n ( %)

17 (70,8)

123 (75,0)

0,66

ПИКС в анамнезе, n ( %)

9 (37,5)

45 (27,4)

0,31

ОНМК в анамнезе, n ( %)

4 (16,6)

12 (7,3)

0,12

ЧКВ в анамнезе, n ( %)

4 (16,6)

7 (4,2)

0,036

КШ в анамнезе, n ( %)

4 (16,6)

6 (3,6)

0,025

Ангиографические особенности коронарного русла

КАГ в госпитальном периоде, n ( %)

23 (95,8)

142 (86,5)

0,19

ЧКВ госпитально, n ( %)

11 (45,8)

72 (43,9)

0,85

Наличие стенозов КА, n ( %)

21 (87,5)

115 (70,1)

0,039

Наличие стенозов трех КА ˃ 50 %, n ( %)

6 (25,0)

15 (9,14)

0,021

Поражение 1 КА, n ( %)

6 (25,0)

42 (25,6)

0,94

Поражение 2-х КА, n ( %)

6 (25,0)

33 (20,1)

0,58

Поражение 3-х КА, n ( %)

9 (37,5)

40 (24,3)

0,17

В группу контроля вошло 187 относительно здоровых индивидуума – русские жители г.Кемерово на основании паспортных и анкетных данных, выразившие добровольное согласие на участие в исследовании. Средний возраст обследованных составил 45,0±9,1 лет и не отличался в подгруппах мужчин и женщин: 45,6±9,1 лет и 44,7±9,2 лет, соответственно. Распределение частот генотипов в группе случай-контроль соответствовало равновесию Харди-Вайнберга.

В табл. 3 представлено распределение частот исследуемых генотипов в подгруппах больных в зависимости от развития и отсутствия «конечных точек» к концу госпитального этапа. При изучении ассоциаций вариабельного сайта rs4343 гена АСЕ было установлено, что носительство аллели G в 2,27 раз (р=0,008), а гомозиготный генотип G/G в 3,18 раз (р=0,02) увеличивают риск неблагоприятного течения госпитального периода у больных ОКСбпST. Равновесие Харди-Вайнберга соблюдено (уровень значимости теста для случаев и контролей р>0,05). Также показано, что генотип Т/Т и аллель Т вариабельного сайта rs4291 гена АСЕ ассоциированы с наличием КТ на госпитальном этапе. Так, носительство аллели Т увеличивало риск неблагоприятного госпитального исхода в два раза (р=0,02), а наличие гетерозиготного генотипа Т/Т – в 3,34 раза (р=0,04).

Таблица 3

Оценка частоты генотипов и аллелей гена ACE (rs4343 и rs4291) и их ассоциаций с наличием неблагоприятного исхода на госпитальном этапе у больных ОКСбпST

Генотип/

Аллель

Неблагоприятный госпитальный исход, n=24

Благоприятный госпитальный исход, n=164

χ2

p

OR

95 % CI

Генотипы ACE rs4343

Общая модель наследования

A/A

4 (16,6 %)

58 (35,3 %)

7,53

0,02

0,37

0,12 – 1,12

A/G

11 (45,8 %)

80 (48,7 %)

   

0,89

0,38 – 2,10

G/G

9 (37,5 %)

26 (15,8 %)

   

3,18

1,26 – 8,04

Аллели

Мультипликативная модель

A

19 (39,6 %)

196 (59,7 %)

6,96

0,008

0,44

0,24 – 0,82

G

29 (60,4 %)

132 (40,3 %)

   

2,27

1,22 – 4,21

Генотипы ACE rs4291

Общая модель наследования

А/А

7 (29,2 %)

76 (46,3 %)

6,61

0,04

0,48

0,19 – 1,21

А/Т

10 (41,7 %)

70 (42,7 %)

   

0,96

0,40 – 2,29

T/T

7 (29,1 %)

18(11,0 %)

   

3,34

1,22 – 9,14

Аллели

Мультипликативная модель

А

24 (50 %)

222 (67,7 %)

5,79

0,02

0,48

0,26 – 0,88

T

24 (50 %)

106 (32,3 %)

   

2,09

1,14 – 3,86

В ходе нашего исследования было показано влияние на неблагоприятный госпитальный исход пациентов ОКСбпST не только наличие значимых стенозов коронарных артерий, но и носительство генотипа G/G rs4343 и Т/Т rs4291 гена АСЕ. В опубликованных ранее работах показано, что полиморфные варианты данного гена ассоциированы как с высоким риском развития, так и с неблагоприятным течением ОКС [5]. В последнее время также получены данные о влиянии изучаемых генов на долгосрочный прогноз. Так, в исследовании Зыкова М.В. с соавторами (2012) получены данные о связи вариабельного сайта rs4343 гена АСЕ с прогрессированием атеросклеротического поражения сонных артерий в течение 4-летнего наблюдения у 165 пациентов с ОКС с подъемом сегмента ST, а генотипа Т/Т и аллели Т вариабельного сайта rs4291 с наличием и выраженностью стенозов периферических артерий (более 30 %) и смертностью в течение года [1]. В работе Jia E.Z. c cоавторами (2014) была показана связь вариабельного сайта rs4343 со смертностью от всех причин среди пациентов с ангиографически подтвержденным коронарным атеросклерозом [7]. Кроме того, установлено, что повышенный уровень ангиотензина-II в плазме крови был связан с более высокой смертностью в отдаленном периоде (9,6 лет) от всех причин, даже после поправки только на летальные исходы по сердечно-сосудистой причине. В Японии проведено девятилетнее наблюдение (2011), результаты которого показали взаимосвязь вариабельного сайта rs4343 (ОШ=1,226 (1,024–1,468), р=0,027) с долгосрочной смертью, независимо от причины [10]. В работе Макеевой O.A. с соавторами (2013), проведенной на выборке из 165 больных ОКС с подъемом ST-сегмента, показано, что аллель Т rs4291 гена ACE является фактором риска для сердечно-сосудистой смерти в течение одного года после ИМ с подъемом сегмента ST [8]. Неблагоприятная роль носительства аллели Т и генотипа Т/Т rs4291 гена АСЕ в отношении развития неблагоприятного госпитального исхода также показано и в нашей работе.

Заключение

Таким образом, установлено, что у больных ОКСбпST неблагоприятный госпитальный исход ассоциирован с наличием гиперхолестеринемии, стенозирующего коронарного атеросклероза, в том числе и совокупного поражения трех коронарных артерий, а также носительством аллели G и генотипа G/G rs4343 и аллели T и генотипа T/T rs4291 гена АСЕ.


Библиографическая ссылка

Бернс С.А., Шмидт Е.А., Макеева О.А., Нагирняк О.А., Клименкова А.В., Жидкова И.И., Барбараш О.Л. АССОЦИАЦИИ ВАРИАБЕЛЬНЫХ САЙТОВ (RS4343 И RS4291) ГЕНА АНГИОТЕНЗИНПРЕВРАЩАЮЩЕГО ФЕРМЕНТА С НЕБЛАГОПРИЯТНЫМ ГОСПИТАЛЬНЫМ ИСХОДОМ У БОЛЬНЫХ ОСТРЫМ КОРОНАРНЫМ СИНДРОМОМ БЕЗ ПОДЪЕМА СЕГМЕНТА ST // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. – 2017. – № 3-1. – С. 44-48;
URL: https://www.applied-research.ru/ru/article/view?id=11395 (дата обращения: 19.01.2021).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074