Научный журнал

Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований

ISSN 1996-3955

ИФ РИНЦ = 0,593

• Авторы
• Резюме
• Файлы
• Ключевые слова
• Литература

Ветлугина Т.П. 3 Плотников Е.В. 1 Никитина В.Б. 3 Лобачева О.А. 3 Савочкина Д.Н. 3 Радионова Т.С. 3 Плотников В.М. 2 Бохан Н.А. 3

---

1 Национальный исследовательский Томский политехнический университет

2 ООО «Политек»

3 ФГБНУ «Научно-исследовательский институт психического здоровья»

Проведено исследование влияния водорастворимой соли лития и аскорбиновой кислоты аскорбата лития на устойчивость эритроцитов к действию этанола. Эритроциты больных алкоголизмом инкубировали с 10% раствором этанола при + 37°C с добавлением аскорбата лития в конечной концентрации лития в инкубационной смеси 0,48 4,8 ммоль/л. Установлено, что применение аскорбата лития позволяет повысить устойчивость эритроцитов крови больных алкоголизмом к гемолизу, индуцированному этанолом, в 1,5–2,2 раза по сравнению с контролем (эритроциты с добавлением в инкубационную смесь физиологического раствора).

Статья в формате PDF

1355 KB

эритроциты

гемолиз

этанол

аскорбат лития

алкоголизм

1. Балашов П.П. Сравнительное изучение нейротоксического действия солей лития / П.П. Балашов, Е.Ю. Аникина, Е.В. Плотников, А.В. Потапов, В.С. Чучалин // Сибирский вестник психиатрии и наркологии. – 2008. – № 4 (51). – С. 83–84.

2. Бохан Н.А. Клинико-патобиологические закономерности формирования и патоморфоза алкоголизма и наркоманий в социально-организованных популяциях / Н.А. Бохан, А.И. Мандель, И.А. Артемьев, Т.И. Невидимова, Е.И. Батухтина, И.В. Воеводин, А.Ф. Аболонин, А.В. Солонский, В.Д. Прокопьева, В.А. Тощакова, Е.В. Епимахова, Т.В. Шушпанова // Сибирский вестник психиатрии и наркологии. – 2015. – № 3(88). –С. 53–62.

3. Способ повышения устойчивости к гемолизу эритроцитов и восстановление их поврежденной формы: патент 2162698 Рос. Федерация / В.Д. Прокопьева, А.А. Болдырев, Н.А. Бохан, В.Я. Семке, Е.М. Кулагин. – № 98119668/14; заявл. 29.10.1998; опубл. 10.02.2001. Бюл. № 4. – 5 с.

4. Способ повышения устойчивости эритроцитов к гемолизу, индуцированному этанолом: патент 2315605 Рос. Федерация / Т.П. Ветлугина, В.Х. Жилов.– № 2005123964/15; заявл. 27.07.2005; опубл. 27.01.2008. Бюл. № 3. – 6 с.

5. Chukwurah P.N. Protective capacity of Artemisia annua as a potent antioxidant remedy against free radical damage / P.N. Chukwurah, E.A. Brisibe, A.N. Osuagwu, T. Okoko // Asian Pac J Trop Biomed. – 2014. – № 4, Vol. 1. – Р. 92–98. doi: 10.12980/APJTB.4.2014C731.

6. Cylwik B. The distribution of serum folate concentration and red blood cell indices in alcoholics / В. Cylwik, М. Naklicki, Е. Gruszewska, М. Szmitkowski, L. Chrostek // J Nutr Sci Vitaminol (Tokyo). – 2013. – № 59, Vol. 1. – Р. 1–8.

7. Maturu P. Modification of erythrocyte membrane proteins, enzymes and transport mechanisms in chronic alcoholics: an in vivo and in vitro study / Р. Maturu, D. R. Vaddi, P. Pannuru, V. Nallanchakravarthula // AlcoholAlcohol. – 2013. – № 48, Vol. 6. – Р. 679–686. doi:10.1093/alcalc/agt071.

8. Plotnikov Е. Lithium-based antioxidants: electrochemical properties and influence on immune cells / Е. Plotnikov, E. Korotkova, O. Voronova, E. Dorozhko, N. Bohan, S. Plotnikov // Physiology and pharmacology. – 2015. – № 19. – Р. 107–113.

9. Sonmez M. The effect of alcohols on red blood cell mechanical properties and membrane fluidity depends on their molecular size / М. Sonmez, H.Y. Ince, O. Yalcin, V. Ajd?anovi?, I. Spasojevi?, H.J. Meiselman, O.K. Baskurt // PLoS One. – 2013. – № 8, Vol. 9. – e76579. doi: 10.1371/journal.pone.0076579.

10. Yan X. A study on the effect of ethanol extract of Radix rhapontici on erythrocyte immune function in rats / Х. Yan, Н. Zhao, Y. Guan, Y. Song, J. Meng // J Afr J Tradit Complement Altern Med. – 2013. – № 10, Vol.6. – Р. 538–541.

Алкогольная зависимость до настоящего времени остается значимой медико-социальной проблемой для России и других развитых стран в связи с высокой распространенностью, увеличением удельного веса тяжелых и ассоциированных форм, присоединением сопутствующих соматических заболеваний [2]. Чувствительной тест-системой внутренней среды организма при различных патологических состояниях являются клетки красной крови. При алкоголизме обнаруживается структурно-функциональная дезорганизация эритроцитов, изменение их морфологии, модификация липидного бислоя, сопровождающаяся снижением гемолитической устойчивости и развитием анемии [6; 7; 9]. В связи с этим, важное значение приобретает расширение арсенала защитных средств биологических мембран эритроцитов от воздействия этанола [3; 5; 10]. В нашей работе в качестве мембранопротектора эритроцитов была изучена синтезированная водорастворимая соль лития и аскорбиновой кислоты – аскорбат лития. Интерес к синтезированным органическим солям лития, как основы для создания новых лекарственных средств, обусловлен применением препаратов лития, чаще в виде карбоната лития, для лечения биполярного аффективного расстройства и аффективных нарушений у больных алкоголизмом.

Цель исследования

Исследовать влияние аскорбата лития на устойчивость эритроцитов больных алкоголизмом к гемолизу, индуцированному этанолом.

Материалы и методы исследования

Материалом для исследования являлись эритроциты, выделенные из венозной крови 12 больных алкоголизмом. Необходимое для эксперимента количество аскорбата лития синтезировано на кафедре физической и аналитической химии Томского политехнического университета; молекулярная масса соли без кристаллизационной воды 182 г/моль, содержит 1 ион лития (рисунок).

Аскорбат лития Карбонат лития

Структурные формулы тестируемых соединений лития

В качестве препарата сравнения использовали карбонат лития производства ЗАО «Вектон» (Санкт-Петербург); молекулярная масса соли 74 г/моль, содержит 2 иона лития. В медицинской практике применение солей лития контролируется концентрацией ионов лития в плазме, в связи с чем для сравнения эффектов соединений их концентрации в эксперименте пересчитаны на равное содержание ионов лития.

Постановка опыта. В ряд центрифужных пробирок вносят по 100 мкл предварительно отмытых физиологическим раствором эритроцитов пациентов, добавляют равный объем рабочих разведений в физиологическом растворе (исходная концентрация) исследуемой соли лития, содержащих 100; 200; 300; 500; 1000 мкг/мл в расчете на литий (опыт), или физиологического раствора (контроль для каждого образца эритроцитов). Пробы помещают на 30 мин в термостат при + 37 °С для предварительной инкубации. Далее в инкубационную смесь вносят 10 % этанол до разведения исходной концентрации лития в 30 раз и вновь помещают в термостат на 2 часа. После инкубации эритроциты осаждают центрифугированием, измеряют оптическую плотность супернатантов на спектрофотометре при 440 нм. Величину гемолиза эритроцитов в опытных пробах выражают в процентах по отношению к контролю, принимая оптическую плотность контрольных проб за 100 %.

Статистическую обработку данных осуществляли с использованием пакета программ STATISTICA для Windows, версия 7.0. Описательная статистика представлена медианой и межквартильным интервалом (LQ–UQ).

Результаты исследования и их обсуждение

Гемолитическая устойчивость эритроцитов определяется разными методами, при которых на эритроциты воздействуют повреждающими факторами (кислотный гемолиз, термическая травма и др.). Мы применили разработанный в лаборатории клинической психонейроиммунологии НИИ психического здоровья способ, при котором в качестве повреждающего эритроциты фактора использован раствор этанола, что вполне оправдано при изучении свойств эритроцитов больных алкоголизмом [4]. В табл. 1 представлены результаты исследования влияния аскорбата лития на устойчивость эритроцитов к действию этанола.

Таблица 1

Дозозависимый эффект аскорбата лития на гемолиз эритроцитов, индуцированный этанолом (Медиана (LQ–UQ))

Как видно из таблицы, средний процент гемолиза эритроцитов, индуцированного этанолом, в опытных пробах (преинкубация с аскорбатом лития) по отношению к контрольным (преинкубация с физиологическим раствором) колебался в пределах 45,6–66,2 % при всех используемых концентрациях реагента.

Далее была проведена серия сравнительных экспериментов по влиянию карбоната лития на устойчивость эритроцитов к действию этанола. Использовали эритроциты 5 больных алкоголизмом, рабочие разведения карбоната лития содержали 100; 200; 300 мкг/мл в расчете на литий, постановка опыта была аналогична опыту с аскорбатом лития. Результаты данной серии опытов приведены в табл. 2.

Таблица 2

Влияние карбоната лития на устойчивость эритроцитов больных алкоголизмом к действию этанола (Медиана (LQ–UQ)

Только при концентрации лития в инкубационной смеси 3,33 мкг/мл процент гемолиза эритроцитов, индуцированного этанолом, был близок к показателю в контрольных пробах (94,5 %), а при более высоких дозах − значительно его превосходил, и карбонат лития приводил, практически, к полному гемолизу эритроцитов.

В психиатрии и наркологии для редукции аффективной симптоматики терапевтическая концентрация ионов Li+ в плазме должна быть 0,6−1,6 ммоль/л в зависимости от клинического состояния пациента. Используемые в эксперименте конечные концентрации лития в инкубационной смеси с этанолом в молярном выражении составляют 0,48; 1,44; 2,40; 4,8 ммоль/л, т.е. соответствуют терапевтической концентрациям ионов Li+ в крови пациентов или ее превышают. При этом аскорбат лития во всех исследованных дозах оказывает мембранопротекторное действие и значительно повышает устойчивость эритроцитов к действию этанола.

Проведенный ранее комплекс токсикологических и гистологических исследований на мышах линии BALB/c показал отсутствие нейротоксического эффекта аскорбата лития по сравнению с карбонатом лития [1]. Установлено также, что аскорбат лития обладает антиоксидантной и иммуномодулирующей активностью [8]. Полученные в настоящем исследовании данные показали, что применение аскорбата лития позволяет повысить устойчивость эритроцитов крови больных алкоголизмом к гемолизу, индуцированному этанолом, в 1,5−2,2 раза. Проведенный комплекс исследований различных эффектов аскорбата лития свидетельствует о перспективности его дальнейшего изучения и продвижения в психиатрическую и наркологическую практику.

Библиографическая ссылка