Scientific journal

International Journal of Applied and fundamental research

ISSN 1996-3955

ИФ РИНЦ = 0,593

Лимфатические узлы при общем типе структурной организации обладают динамичным изменением структурно-функциональных зон, что обусловливает особенности иммуноморфологических реакций при действии патогенных и саногенных факторов внешней среды [3]. При этом возникает необходимость морфофункциональной оценки лимфоузлов, так как они являются одним из элементов общей протективной системы организма [8]. При этом реактивные изменения, касающиеся структурной организации лимфоузлов, не всегда находят свое объяснение, особенно, на позднем этапе онтогенеза [2]. С возрастом происходит старение лимфоидной ткани с неизбежным снижением неспецифической резистентности организма. Актуальным остается поиск средств и способов, способных скорректировать структурные изменения лимфоузлов и повысить иммунный статус в лимфатическом регионе. Выбор сделан в пользу озоно- и фитотерапии, так как они обладают адаптогенными и лимфотропными эффектами действия [5–7] и широко используются в эндоэкологической реабилитации. Но до сих пор практически отсутствуют работы оценивающие эффект озоно- и фитотерапии на структурную организацию лимфоузлов с учетом современных концепций лимфатического региона, протективной системы [3, 8] и фитолимфонутрициологии [5].

Цель исследования – оценить влияние сочетанной озоно- и фитотерапии на структурную организацию лимфоузла, претерпевшего возрастные изменения.

Материалы и методы исследования

Эксперимент проведен на 160 белых крысах-самцах Wistar с условно выделенными возрастными группами: «молодые» в возрасте 3–5 месяцев (контрольная группа) и «старые» в возрасте 1,5–2 года (группа сравнения) с учетом соотношения продолжительности жизни крыс и человека [4]. Работу с животными выполняли в соответствии с международными правилами и нормами (European Communities Council Directives of 24 November 1986, 86/609/EEC), согласно «Международным рекомендациям по проведению медико-биологических исследований с использованием животных» (1985), приказу МЗ РФ № 267 от 19.06.2003 г. с общей анестезией болезненных манипуляций. Животные получали при свободном доступе к воде стандартную диету.

В эксперименте использовали оригинальный фитосбор в суточной дозе 0,1-0,2 г/кг в течение месяца у животных разного возраста. Состав фитосбора: бадан, родиола розовая, копеечник сибирский, лист черники, брусники, смородины, шиповник майский, чабрец, пищевые волокна. Основными действующими биоактивными веществами и одновременно определяющими подлинность фитосбора являются флавоноиды (рутин), арбутин, пищевые волокна. Аппликацию озонированного оливкового масла осуществляли на область лимфосбора паховых лимфоузлов на 15-20 минут через день, на курс 14 процедур.

Паховые лимфатические узлы исследовали гистологическим методом [2]. Гистологические срезы лимфоузлов окрашивали гематоксилин-эозином, азур-эозином и подвергали морфометрическому анализу, используя программу Image-Pro Plus 4.1 [1]. В работе использовали статистический метод с определением средней арифметической, среднеквадратичной ошибки и достоверности различий при p < 0,05 с помощью программы StatPlus Pro 2009, AnalystSoft Inc.

Результаты исследования и их обсуждение

Лимфатические узлы с возрастом испытывают состояния функциональной напряженности [3, 6, 7]. Инволюции лимфоидной паренхимы сопровождается частичной гиперплазией сохранившихся структурно-функциональных зон, входящих в состав лимфоидной дольки лимфоузла. Именно сохранность лимфоидной дольки определяет иммунный потенциал лимфоузла на позднем этапе онтогенеза. Отдельные структуры лимфоузла могут увеличиваться при снижении клеточной плотности в них. Особенно четко это выражено в паракортексе, в то время как в других структурно-функциональных зонах лимфоузла клеточная плотность изменяется в меньшей степени. Структура паракортекса разряжена из-за уменьшения клеточной плотности с возрастом (рис. 1). Опустошение лимфоидной ткани связывают с миграцией клеток в кровоток и снижением пролиферативных процессов вследствие возраст-обусловленной инволюции лимфоидной ткани на фоне склероза [3, 8].

Рис. 1. Разрежение паракортекса с сохранением компактного расположения лимфоидной ткани по периферии. Уменьшение клеточной плотности. В периферической коре лимфоидные узелки без герминативного центра. Старые животные в возрасте 1,5 года. Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение ок.7, об. 4

В свою очередь изменение размерности структурно-функциональных зон приводит к неоднородности структуры лимфоузла, демонстрируя морфологические эквиваленты компенсации возраст-обусловленной трансформации (таблица). На стадии позднего онтогенеза это проявляется увеличением площадей в 1,4 раза капсулы (1,62 ± 0,07 % по сравнению с 1,16 ± 0,09 % в контроле), в 1,6 раза коркового плато (1,90 ± 0,08 % по сравнению с 1,20 ± 0,09 % в контроле), паракортекса в 1,3 раза (8,94 ± 0,49 % по сравнению с 7,14 ± 0,67 % в контроле), мозгового синуса в 2,3 раза (2,94 ± 0,20 % по сравнению с 1,30 ± 0,12 % в контроле) на фоне уменьшения в 1,2 раза площади лимфоидных узелков с герминативным центром (1,37 ± 0,12 % по сравнению с 1,61 ± 0,17 % в контроле). Характер изменения площади основных структурно-функциональных зон приводит к снижению иммунной функции лимфоузла, что является дестабилизирующим моментом на этапе позднего онтогенеза.

Площадь структур пахового лимфоузла у молодых и старых животных без коррекции и после озоно- и фитотерапии, %

Примечание. *P1-2-3 < 0,05, °P3-4 < 0,05 – достоверность различий.

Рис. 2. Гиперплазия паракортекса на фоне восстановленной клеточной плотности. Расширенная синусная система. Озоно- и фитотерапии у старых животных. Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение ок. 7, об. 4

Применение озоно- и фитотерапии решает задачу по оптимизации структуры и функции лимфоузла. При этом реализуются принципы лимфосанации, лимфопротекции и лимфостимуляции [3, 6, 8], обусловливающие позитивный эффект на разных уровнях структурной организации лимфатического региона.

Сочетанная озоно- и фитотерапия изменяет структурную организацию лимфоузла, претерпевшего возрастные изменения (таблица). Происходит уменьшение в 1,3 раза площадей коркового плато (1,45 ± 0,19 % по сравнению 1,90 ± 0,08 % без коррекции), паракортекса (7,17 ± 0,31 % по сравнению с 8,94 ± 0,42 % без коррекции) и мозгового синуса (1,61 ± 0,11 % по сравнению с 2,94 ± 0,20 % без коррекции) на фоне увеличения в 1,8 раза площади лимфоидных узелков с герминативным центром (2,48 ± 0,25 % по сравнению с 1,37 ± 0,12 % без коррекции), в 1,2 раза площади мякотных тяжей (6,04 ± 0,48 % по сравнению с 5,02 ± 0,34 % без коррекции). Характер изменения структурно-функциональных зон лимфоузла после озоно-и фитотерапии указывает на заинтересованность Т- и В-зон. Это выражается в восстановлении клеточной плотности структурно-функциональных зон, в частности, паракортекса (рис. 2), стимуляции В-зоны (увеличение площади лимфоидных узелков и мякотных тяжей, см. таблицу). Все эти изменения указывают на активизацию клеточного и гуморального звеньев иммунитета при повышении дренажной функции лимфоузла после озоно- и фитотерапии. Происходит усиление естественной интракорпоральной детоксикации в лимфатическом регионе на этапе позднего онтогенеза [6], что позитивно сказывается на структурной организации лимфоузла.

Впервые установлен эффект неолимфогенеза для озоно- и фитотерапии. Неолимфогенез – широко обсуждаемая тема в литературе [9, 10]. Усиление лимфопролиферации при озоно- и фитотерапии приводит к скоплению лимфоцитов и образованию лимфоидных узелков (фолликулов) за пределами лимфоузла. Лимфоидные узелки являются прообразом формирующегося лимфоузла [9, 10]. В свою очередь, образование новых лимфоидных узелков следует рассматривать, как компенсаторную реакцию к восстановлению иммунной защиты, ослабленной на этапе позднего онтогенеза.

Наряду с этим, наблюдается гиперплазии отдельных структурно-функциональных зон, а также фрагментация лимфатического узла за счет обособления выступающих отделов коркового вещества. Наиболее часто обнаруживаются мелкие лимфоидные узелки в межузловой клетчатке паховых лимфоузлов. Образование нетипично расположенных новых лимфоидных структур за пределами лимфоузла есть результат изменения лимфодренажа и усиления лимфопролиферации после озоно- и фитотерапии. Озоно- и фитотерапия способствует сохранению лимфоидной ткани и усиливает иммунный потенциал лимфоузлов на фоне повышения пролиферации и миграции лимфоидных клеток.

Заключение

На позднем этапе онтогенеза происходит реорганизация структуры лимфоузлов, отражающая общий процесс старения и сопровождающаяся снижением функциональной активности лимфоидной ткани в пожилом и старческом возрасте.

Сочетанная озоно- и фитотерапия оказывает модулирующее действие на структурно-функциональные зоны лимфоузла при усилении лимфопролиферативных процессов и неолимфогенеза. Это обеспечивает повышение дренажно-детоксикационной и иммунной функций лимфоузла на позднем этапе онтогенеза.

Результат имеет практическое значение по использованию озоно- и фитотерапии для повышения неспецифической резистентности организма и эффективности эндоэкологической реабилитации в пожилом и старческом возрасте.